在細(xì)胞培養(yǎng)、制藥生產(chǎn)、生物制劑過濾、無菌檢驗與高純試劑制備中,無菌微孔濾膜通過0.22μm或0.45μm的精密孔徑,高效截留細(xì)菌、微粒與雜質(zhì),確保液體的無菌狀態(tài)。正確安裝
無菌微孔濾膜,是確保其完整、密封的關(guān)鍵,直接關(guān)系到無菌操作的成功與否。

一、安裝前準(zhǔn)備
環(huán)境與工具:
在超凈臺或生物安全柜內(nèi)操作,開啟紫外滅菌30分鐘,再通風(fēng)15分鐘;
操作者穿戴無菌手套、口罩與實驗服,避免手部污染。
器材檢查:
確認(rèn)濾器(濾杯、濾膜支架、底座)已高溫高壓滅菌(121℃,20min)并冷卻;
檢查濾膜包裝是否完好,生產(chǎn)日期是否在有效期內(nèi);
核對濾膜材質(zhì)(如PVDF、PES、尼龍)與孔徑(0.22μm)是否符合樣品要求。
二、濾膜取出
關(guān)鍵原則:嚴(yán)禁用手或非無菌工具直接接觸濾膜表面!
正確操作:
用無菌鑷子(火焰滅菌后冷卻)輕輕撕開濾膜外包裝;
夾取濾膜邊緣,將其平穩(wěn)放置于濾器底座的支撐網(wǎng)上;
確保濾膜展開、無褶皺、無破損,且覆蓋支撐網(wǎng)孔。
三、濾器組裝
順序與方向:
將濾膜光滑面朝上(即液體流入面),粗糙面朝下與支撐網(wǎng)接觸;
將濾杯(上部)對準(zhǔn)底座,垂直向下緩慢旋緊或卡緊。
力度控制:
用手均勻施力擰緊,切勿使用扳手等工具強行緊固,防止濾膜變形、破裂或底座螺紋損壞;
確保濾杯與底座結(jié)合處無縫隙,形成氣密性連接。
四、氣密性測試
正壓測試法(推薦):
將濾器出口連接真空泵或氮氣源(壓力≤0.1MPa);
關(guān)閉入口,向濾器內(nèi)通入低壓氣體;
在接口處涂抹無菌水或肥皂水,觀察30秒;
若無氣泡產(chǎn)生,表明密封良好;若有氣泡,需重新組裝。
負(fù)壓測試法:
連接真空泵,抽真空至-0.08MPa,關(guān)閉閥門,觀察壓力是否在5分鐘內(nèi)保持穩(wěn)定。
五、過濾操作
確認(rèn)氣密性合格后,將待過濾液體倒入濾杯;
連接真空泵(負(fù)壓過濾)或加壓源(正壓過濾),開始過濾;
過濾過程中觀察濾膜是否破裂(液體渾濁或流速異常加快)。
六、使用后處理
過濾完成后,先釋放壓力,再小心拆卸濾器;
用鑷子取出濾膜,按生物危害廢物處理;
濾器組件清洗后,準(zhǔn)備下次滅菌。